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談談液相色譜儀峰形異常情況及解決辦法

點擊次數:532  發布時間:2021-11-30
  今天小編給大家講講液相色譜儀峰形異常情況及解決辦法:
 
  液相色譜作為一個既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離的儀器,具有靈活多樣的特點,其應用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更為突出。在液相色譜使用過程中,比較常見的峰形異常一般有下列一些情況:
 
  1)所有峰均為負峰。解決方法:信號電纜接反或檢測器輸出極性設置顛倒;光學裝置尚未達到平衡。
 
  2)所有峰均為寬峰。解決方法:系統未達到平衡;溶解樣品的溶劑極性比流動相差很多;色譜柱尺寸及類型選擇不正確;色譜柱或保護柱被污染或柱效降低;溫度變化造成的影響。
 
  3)色譜圖中未出峰。解決方法:系統未進樣或樣品分解;泵未輸液或流動相使用不正確;檢測器設置不正確;針對以上情況成因作相應調整即可。
 
  4)一個峰或幾個峰是負峰。解決方法:流動相吸收本底高;進樣過程中進入空氣;樣品組分的吸收低于流動相。
 

液相色譜儀

 

  5)所出峰比預想的小。解決方法:樣品黏度過大;進樣品故障或進樣體積誤差;檢測器設置不正確;定量環體積不正確;檢測池污染;檢測器燈出現問題。
 
  6)出現雙峰或肩峰。解決方法:進樣量過大;樣品濃度過高;保護柱或色譜柱柱頭堵塞;保護拄或色譜柱污染或失效;柱塌陷或形成短通道。
 
  7)前伸峰。解決方法:進樣量或樣品濃度高;溶解樣品的溶劑較流動相極性強;保護柱或色譜柱污染或失效。
 
  8)拖尾峰。解決方法:柱超載,降低樣品量;增加柱直徑采用較高容量的固定相;峰干擾,對樣品進行清潔過濾;調整流動相;硅羥基作用,加入三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相pH值;柱內燒結不銹鋼失效,更換燒結不銹鋼;加在線過濾器,對樣品進行過濾;死體積或柱外體積過大,將連接點降至z低;盡可能使用內徑較細的連接管;柱效下降,更換柱子;采用保護柱,對柱子進行再生。
 
  9)出現鬼峰。解決方法:進樣閥殘余峰,在每次進完樣后用充足的時間來平衡和清洗系統;樣品中存在未知物,改進樣品的預處理;流動相污染,更換新流動相,盡可能現配現用,隔夜的流動相再次使用時要過濾;盡可能使用HPLC級試劑;流路中有小的氣泡,打開Purge閥,加大流速排除。
 
  10)出現平頭峰。解決方法:檢測器設置不正確;進樣體積太大或樣品濃度太高。
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